摘要：目的：采用淫羊藿素（icaritin，ICT）改变小鼠胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES细胞）体外培养微环境，论证ICT提高ES细胞体外定向分化为神经细胞的效应。方法：采用拟胚体培养法，评价ICT对ES细胞体外定向分化为神经细胞的诱导作用；并利用RT—PCR法和免疫荧光法鉴定神经细胞特异基因和蛋白表达谱。结果：ICT在10^-7mol／L浓度时，对ES细胞定向分化为神经细胞表型呈现最佳诱导效应，在分化d8＋8时，分化率高达80％（P〈0．001），并呈良好的量效和时效关系。分化神经表型者表达神经元特异性微管蛋白（β-tubulin Ⅲ）基因和神经胶质细胞特异性胶质纤维酸性蛋白（GFAP）基因，同时伴有神经前体细胞特异性标志蛋白（nestin）及β—tubulin Ⅲ和GFAP特异性蛋白阳性表达。结论：应用拟胚体培养微环境调控法，ICT可诱导小鼠ES细胞定向分化为神经细胞，并与神经发育依赖性特异基因和蛋白表达呈正相关。

关键词：神经元 干细胞 细胞 培养的 荧光免疫测定 

单位：浙江大学药学院药理毒理与生化药学研究所; 浙江杭州310058