摘要：目的：探索3-（4-溴苯基）-2-（乙砜基）-6-甲基喹喔啉-1，4-二氧化物（Q39）在缺氧条件下诱导人白血病K562细胞凋亡的作用机制。方法：①MTT法测定Q39对K562细胞的体外抑制作用，计算其半数抑制浓度（IC50）。②4，6-Diamidino-2-Phenylindole（DAPI）荧光染料染色观察细胞的凋亡情况。③流式细胞术测定K562细胞凋亡率。④JC-1染色法观察Q39对K562细胞线粒体膜电位（△ψm）的影响。⑤Western—blotting法检测低氧条件下细胞内procaspase-3、cleaved caspase-3、PARP、Bax、Bcl-2和HIF—1α蛋白表达的变化。结果：在缺氧（3％O2）条件下，Q39对K562细胞表现出较强的体外抑制增殖作用，IC50为（0．21±0．05）μmol／L。经DAPI染色证实，Q39作用6h后开始诱导K562细胞凋亡，后期细胞体积缩小，并出现凋亡小体。流式细胞术结果显示：K562细胞与Q39共孵育0、6、12和24h的凋亡率分别为2．8％、3．2％、5．9％和19．2％。JC-1染色实验结果显示：孵育0、6、12、24和48h后Q39使K562细胞的线粒体△ψm呈明显下降趋势，并且具有时间依赖关系。Western—blotting结果显示：Q39降低K562细胞的HIF—1α、procaspase-3和Bcl-2蛋白表达，明显增加Bax和cleaved caspase-3蛋白表达，并且促使PARP裂解。结论：Q39在缺氧条件下对K562细胞有较好的抑制作用，并能通过降低HIF—1α蛋白表达和调节其他凋亡相关蛋白表达，促使K562细胞线粒体△ψm下降，诱导细胞凋亡。Q39诱导细胞凋亡可能是通过线粒体和HIF—1α信号转导通路实现的。

关键词：k562细胞 缺氧 线粒体 流式细胞术 

单位：浙江大学药学院; 浙江杭州310058