摘要：目的：探究在高龄SHR大鼠心室膜蛋白中，KCNE2蛋白是否发生了磷酸化修饰。方法：用碱性磷酸酶处理高龄SHR大鼠心室膜蛋白，以抗KCNE2的抗体（Ab2）为一抗进行免疫印迹；将在蛋白离体系统中翻译出的含c—myc的KCNE2融合蛋白经碱性磷酸酶处理后，分别以Ab2和抗c—myc的抗体为一抗的免疫印迹；以及一系列的c—myc—hKCNE2的单点（KCNE2Y96F和KCNE2S98A）和双点突变（KCNE2Y96F/S98A）实验。结果：高龄SHR大鼠心室膜蛋白样品经碱性磷酸酶处理后，极大地减弱了Ab2对KCNE2蛋白的识别能力；另外，蛋白离体系统中翻译出的含c—myc的KCNE2融合蛋白经碱性磷酸酶处理后，虽然极大地减弱了Ab2对其融合蛋白的识别能力，却没有影响抗c—myc抗体对KCNE2融合蛋白的识别能力。定点突变的结果显示，虽然以抗c—myc抗体为一抗的免疫印迹结果显示，蛋白质离体翻译系统成功地翻译出了单突变子KCNE2S96A及双突变子KCNE2Y96F／S98A蛋白，但不论样品被碱性磷酸酶处理与否，Ab2在这些样品中均检测出很弱的KCNE2蛋白免疫条带。结论：在高龄SHR大鼠心室组织中，KCNE2第98位丝氨酸可能发生了磷酸化修饰。然而该位点的磷酸化修饰是否会通过影响心脏的电生理，而在SHR大鼠心脏病变过程中起着一定的作用，有待于从电生理的水平上进一步研究。

关键词：磷酸化 点突变 心脏 钾通道 kcne2蛋白 

单位：西安交通大学医学院遗传与分子生物学系; 陕西西安710061; 佛吉尼亚联邦大学生理学系; 美国Richmond; VA23298