摘要：目的：研究端粒结合因子-1（TRF1）丝氨酸219位磷酸化对细胞周期的影响。方法：突变TRF1的219位氨基酸，构建模拟磷酸化和非磷酸化状态的突变体TRF1^S219D-GFP和TRF1^S219-GFP，核苷酸测序和免疫印迹验证目的基因序列及蛋白表达。将野生型和突变体质粒用脂质体转染法转入HeLa细胞，观察它们在细胞中的定位、流式细胞仪检测各细胞周期的细胞数量、免疫印迹检测转染后ATM蛋白水平的改变。结果：测序证实突变成功，GFP抗体免疫印迹证实了突变体的蛋白表达。荧光显微镜下观察到TRF1^S219A-GFP和TRF1^S219D-GFP均呈点状定位于细胞端粒。流式细胞仪结果显示，过表达野生型和非磷酸化突变体的HeLa细胞产生G2／M期的阻滞（P〈0．05）。转染野生型和突变体后HeLa细胞中ATM蛋白含量均比对照组增高。结论：ATM激酶对TRF1丝氨酸219位的磷酸化可以抑制由于TRF1过量表达而引起的细胞周期G2／M期的阻滞。

关键词：端粒 端粒结合蛋白类 atm 磷酸化 细胞周期 

单位：浙江大学医学院附属第一医院血液科; 浙江杭州310003