摘要：目的：构建针对人乙酰肝素酶（HPSE）基因的小干扰RNA（siRNA）及其表达载体，转染细胞后观察其对HPSE基因的干扰作用。方法：设计HPSE靶向的发夹状siRNA，合成两条互补的寡核苷酸链，退火后连接入pRNATU6．1载体，转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹转染人恶性黑素瘤细胞A375，采用半定量PCR测定HPSE基因RNA水平变化，Western blot检测HPSE蛋白表达的变化。结果：将针对HPSE基因的siRNA的双链寡核苷酸片段克隆到pRNATU6．1载体，经过阳性菌落PCR鉴定与测序，结果正确；转染A375细胞后，半定量PCR和Western blot检测显示，HPSE基因和蛋白的表达水平明显降低（P〈0．05）。结论：成功构建了针对HPSE基因的siRNA载体，转染细胞后可抑制HPSE的表达。

关键词：寡核苷酸类 反义 葡糖醛酸糖苷酶 rna 小分子干扰 

单位：浙江大学医学院附属第一医院皮肤科; 浙江杭州310003; 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所; 浙江杭州310003