摘要:目的:利用合成的寡核苷酸片段,在体外拼接人抵抗素(Resistin,Retn)基因的全长,并构建其真核表达载体。方法:根据已知抵抗素基因(GenBank:AF323081),设计并合成10条寡核苷酸片段,采用降落PCR方法进行拼接,获得预期大小的PCR产物后将其克隆入pSecTag2B载体进行测序确认。结杲:降落PCR法扩增的特异条带与目的基因的大小一致。克隆载体测序结果与GenBank中已知序列完全符合。结论:降落PCR成功地拼接和扩增了人抵抗素全长基因,并构建了含有该基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定了实验基础。
关键词:激素类 异位 寡核苷酸类 聚合酶链反应 基因扩增
单位:浙江大学医学院附属第一医院干部病房; 浙江杭州310003; 浙江大学医学院第一附属医院传染病研究所; 浙江杭州310003; 浙江大学医学院解剖学教研室; 浙江杭州310058
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