摘要：目的：探讨C6细胞在加热后的生物学行为改变及转染外源性野生型p53基因（wtp53）对C6胶质瘤热疗的影响。方法：提取与鉴定真核表达载体pCMV—p53，利用红色荧光蛋白确定转染质粒和脂质体的最佳比例。wtp53真核表达质粒稳定转染至大鼠C6胶质瘤细胞系，通过neo基因表达的检测确定目的基因转染的成功性。设置C6／p53（＋）细胞组、C6细胞加热组、C6／p53（＋）细胞加热组、反复加热后生长的热耐受C6细胞组和对照组，观察各组细胞的生物学行为及裸鼠接种成瘤率。对裸鼠皮下各组异种胶质瘤做激光间质热疗（laser interstitial thermotherapy，LITT）并比较抑瘤效果。结果：wtp53基因片断经正确鉴定和提取，转染质粒和脂质体的最佳转染比例为1：6。neo基因稳定表达于转染了阳性质粒的C6细胞中。热耐受C6细胞的生长未受影响，C6／p53（＋）细胞组生长速度减慢，加热组在加热12h后细胞增殖明显受影响，而C6／p53（＋）细胞加热组的细胞增殖活性从6h起受到显著抑制；在C6／p53（＋）细胞组、C6细胞加热组、C6／p53（＋）细胞加热组中都可以观察到细胞凋亡形态学改变，流式细胞技术证实C6／p53（＋）细胞加热组凋亡率增加最为明显，达对照组的30倍，差异有显著性（P〈0．01）。C6细胞加热组、C6／p53（＋）细胞组、C6／p53（＋）细胞加热组的裸鼠成瘤率均有下降，分别为75％、57％、20％，而热耐受C6细胞组为100％。C6／p53（＋）裸鼠LITT组与假手术组疗效比较差异有显著性（P〈0．001），较C6裸鼠LITT组也有统计学差异（P〈0．05）。而热耐受C6裸鼠的抑瘤效果在所有的LITT实验组最低。结论：p53基因可通过真核载体基因转染技术实现在C6细胞中稳定表达，并能在体内、外抑制大鼠C6胶质瘤细胞的生长，wtp53表达上调可增加C6细胞对加热的敏感性。

关键词：基因 p53 高温 诱发 脑肿瘤 

单位：浙江大学医学院附属第二医院神经外科 浙江杭州310009 华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科 湖北武汉430022