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以聚乙烯亚胺-β-环糊精为骨架偶联短肽CY11的转基因载体

虎义平 姜启英 陈丹 赵丹军 陆晓 余海 王青青 周峻 胡秀荣 汤谷平 浙江大学学报·医学版 2009年第01期

摘要:目的:以聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用靶向于肿瘤表面成纤维细胞生长因子受体(FGFR)的短肽CY11(CGMQLPLATWY)偶联于载体材料上,研究该载体材料的基因转染效率。方法:用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N—succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将CY11偶联到PEI-β-CyI)上,合成CY11-PEI—β-CyD。核磁共振氢谱(1H—NMR)、热重分析(TGA)对载体材料进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,MTT法测定载体材料的细胞毒性,在COS7、Hela和B16细胞株上进行体外转染实验。结果:成功合成材料CY11-PEI-β-CyD,在N/P为4时能够有效地浓缩质粒DNA。在B16细胞上,材料CY11-PEI-β-CyI)达到160μg/ml时,细胞存活率仍高于80%。在CY11-PEI—β-CyD/DNA复合物在N/P为20:1时,转染效率是对照组PEI-β-CyD的17倍。结论:CY11-PEI—β-CyD是具有低毒性、高转染且有FGFR靶向性的新型非病毒转基因载体。

关键词:聚乙烯亚胺遗传载体转染质粒肽类

单位:浙江大学化学生物和药物研究所 浙江杭州310028 浙江大学医学院免疫学研究所 浙江杭州310058 浙江大学分析测试中心 浙江杭州310028

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