摘要：目的：探讨人永生化角质形成细胞（HaCaT）和人皮肤原代角质形成细胞（HEKa）接受紫外线照射后的衰老机制及其凋亡、坏死和细胞周期的改变。方法：中波紫外线（UVB）小剂量、多次照射HaCaT细胞和HEKa细胞,以细胞衰老β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）化学染色法观察细胞衰老状态,流式细胞术检测细胞凋亡、坏死和细胞周期阻滞情况;ELISA法检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平;Western blot检测redox蛋白p66Shc的表达;RT-PCR法检测细胞内人端粒酶催化亚单位（human telomerase reverse transcriptase,hTERT）基因在UVB照射前后的表达情况。结果：UVB照射后,SA-β-Gal细胞化学染色结果显示HaCaT细胞和HEKa细胞均呈现强阳性染色。HaCaT细胞的凋亡率从（1.81±0.25）%增至（4.43±0.28）%,坏死率从（0.05±0.01）%上升至（0.10±0.03）%,但细胞周期未见明显阻滞;HEKa细胞的凋亡率从（0.65±0.05）%增至（59.53±2.35）%,坏死率达（3.89±0.24）%,较对照组显著增加（P〈0.05）,且细胞周期大部分阻滞于G0/G1期。HaCaT细胞和HEKa细胞的细胞内SOD活性经UVB照射后显著下降（P〈0.05）,而MDA水平则明显增高。p66Shc蛋白在UVB照射后表达增强。HaCaT细胞在UVB照射前后均高表达hTERT基因,而HEKa细胞不表达hTERT基因。结论：HaCaT细胞和HEKa细胞均可被UVB诱导进入“应激性早衰”状态,此衰老与细胞内氧化应激水平密切相关,而与端粒酶表达无关;但HaCaT细胞的凋亡率、坏死率及细胞周期阻滞情况较HEKa细胞好,这可能与HaCaT细胞高表达端粒酶水平,从而对细胞损伤修复能力及分化调节能力较强有关。

关键词：紫外线 表皮 端粒 末端转移酶 细胞衰老 

单位：浙江大学医学院附属第一医院 浙江杭州310003