摘要：目的：从苦瓜籽中克隆HIV-1整合酶抑制剂MAP30,构建其表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,用于MAP30在细胞内的转运机理研究。方法：从成熟苦瓜种子中提取基因组DNA,通过PCR的方法扩增出MAP30基因的全长,并将其克隆进入原核表达载体pET-30a,转化Eoli.BL21（DE3）,IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和纯化,梯度咪唑洗脱。MTT法分析生物学活性。结果：测序发现插入的MAP30基因序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量正确,且MAP30主要以可溶形式表达。MTT法测定重组的MAP30具有生物学活性,且对肿瘤细胞的毒性远远大于对正常细胞的毒性。结论：本研究成功地构建了MAP30的表达系统,并实现了MAP30的可溶性表达,表达后的蛋白具有生物学活性,可用于抗体-毒素的肿瘤靶向药物的合成。

关键词：map30 苦瓜 植物蛋白质类 核糖体蛋白质类 遗传学技术 

单位：浙江大学医学院生物化学与遗传学系 浙江杭州310058