摘要：目的：构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法：根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DN段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆。其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功。提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21（DE3）表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定。结果：在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV16L1抗体发生特异性反应。结论：HPV16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础。

关键词：基因表达 克隆 分子 乳头状瘤病毒 hpv16l1 

单位：重庆理工大学药学与生物工程学院 重庆400050 重庆市第四人民医院妇产科 重庆400014 重庆市第四人民医院麻醉科 重庆400014 浙江大学医学院附属第一医院 浙江杭州310003