摘要：目的：研究共刺激分子CD137L重组质粒对HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答和回忆反应的佐剂作用。方法：将小鼠CD137L真核表达载体（pcD137L）体外转染NIH3T3细胞,RT-PCR、流式细胞仪和免疫荧光法分别检测CD137L mRNA和蛋白的表达;pcD137L与HBsAg DNA疫苗（pcDS）通过肌肉注射联合免疫BALB/c小鼠,LDH释放法测定体外脾细胞特异性CTL杀伤活性;流式细胞仪分析小鼠脾脏CD8＋记忆T细胞数量;流式细胞仪检测CD8＋T细胞及淋巴细胞中IFN-γ和IL-4的表达水平。结果：重组质粒pcD137L在NIH3T3细胞中获得有效表达。与pcDS单独免疫组比较：免疫后1周,pcDS＋pcD137L免疫组能诱导更强的HBsAg特异性CTL杀伤活性（P〈0.05）;免疫后1周和12周,pcDS＋pcD137L免疫组CD8＋T细胞CD44high和CD127表达水平均显著增高（P〈0.05或P〈0.01）;免疫后1周、12周和13周（即再次给予pcDS刺激后1周）,pcDS＋pcD137L免疫组分别明显上调CD8＋T细胞和淋巴细胞中IFN-γ产生细胞的百分比,差异有显著意义（均P〈0.05）。结论：共刺激分子CD137L能显著增强HBsAg DNA疫苗诱导的Tc1（I型）细胞免疫、特异性CTL应答及回忆反应,是诱导HBV特异性T细胞应答的有效佐剂。

关键词：dna 共刺激分子 cd137l 乙型肝炎病毒 细胞免疫应答 

单位：杭州师范大学基础医学部免疫学教研室 浙江杭州310036 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所 传染病诊治国家重点实验室 浙江杭州310003