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应用抑制性消减杂交技术筛选脂肪细胞分化相关基因

易晓青; 肖延风; 尹春燕; 徐尔迪 浙江大学学报·医学版 2012年第03期

摘要:目的:利用脂肪分化细胞模型筛选与脂肪细胞分化相关的差异性表达基因。方法:采用抑制性消减杂交技术,以诱导分化后的人前体脂肪细胞系SW872总RNA为Tester,诱导分化前的人前体脂肪细胞系SW872为Driver,将消减杂交获得的DN段与pGM-T载体连接,构建cDNA文库后,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆。将获得的阳性克隆插入片段进行测序分析,并与GenBank数据库进行同源性分析,获得差异性表达基因。结果:扩增消减cDNA文库获得135个白色克隆,随机挑选64个进行测序,共获得34个阳性克隆基因。结论:本研究成功构建了脂肪细胞分化差异性表达基因的消减cDNA文库,筛选出了与脂肪细胞分化相关的差异表达基因。

关键词:肥胖症基因文库杂交遗传dna

单位:西安交通大学第二附属医院儿科; 陕西西安710004

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浙江大学学报·医学版

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