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仓鼠经口给予亚砷酸盐后血浆中砷结合蛋白的纯化

王文文; 张敏; 李春辉; 秦颖洁; 那仁满都拉 浙江大学学报·医学版 2013年第01期

摘要:目的:探索用凝胶过滤柱和阴离子交换柱,结合电感耦合等离子质谱仪分离纯化砷结合蛋白,为阐明砷的毒理机制提供技术支持。方法:通过HPLC-ICP—MS技术,采用KW-803色谱柱、凝胶过滤柱和离子交换柱分离纯化仓鼠血浆中的砷结合蛋白;SDS-PAGE凝胶电泳分析由HPLC—ICP—MS系统凝胶过滤柱和离子交换柱获得的每个蛋白样本。结果:①仓鼠单次经口给予三价亚砷酸(iAsIIII)后,运用三步法即利用凝胶过滤、KW-803色谱柱和阴离子交换等色谱柱联用HPLC—ICP-MS,最后纯化得到了仓鼠血浆中砷结合蛋白;②SDS—PAGE凝胶电泳分析由HPLC-ICP—MS系统联用不同凝胶过滤柱和离子交换柱获得的每个蛋白样本,检测到砷结合蛋白分子量大约40~50kD。结论:凝胶过滤柱和阴离子交换柱,结合电感耦合等离子质谱仪是分离纯化动物血浆或组织上清砷结合蛋白简便快速的方法。

关键词:亚砷酸盐类药理学血液分离和提纯

单位:承德医学院病理及病理生理教研室; 河北承德067000; 承德医学院附属医院; 河北承德067000; 浙江大学药理毒理与生化药学研究所; 浙江杭州310058

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