摘要：目的：探索哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）抑制剂雷帕霉素在慢性脑缺血中的作用及机制。方法：6周龄的ICR小鼠通过右颈总动脉结扎诱导慢性脑缺血模型，采用蛋白质印迹法检测造模后不同时期（1、3、6、24h，3、7d，2、4、6周）小鼠大脑皮层和海马组织中mTOR信号通路mTOR、S6K和s6蛋白表达及其磷酸化水平。造模24h后腹腔注射雷帕霉素（3．0mg／kg），经Fluoro-JadeB染色观察细胞凋亡情况，蛋白质印迹法检测mTOR信号通路的变化和对细胞自噬的影响，并采用Morris水迷宫和Y迷宫试验测定小鼠学习记忆功能。结果：模型小鼠大脑皮层和海马组织中mTOR信号通路被异常激活，从6h开始一直持续到6周，表现为mTOR、S6K和s6蛋白磷酸化增加。雷帕霉素可逆转由慢性脑缺血所致的mTOR信号通路激活，并显著减少细胞凋亡（146．1±16．3与84．5±9．6，P〈0．05）。雷帕霉素还能显著逆转慢性脑缺血所导致的Beclinl和LC3-II蛋白的表达。Morris水迷宫和Y迷宫试验结果显示，雷帕霉素组较模型组平台潜伏期缩短[（11．1±2．3）S与（8．1±1．8）S，P〈0．05]、游泳距离延长[（672．8±128．5）cm与（558．2±124．9）cm，P〈0．05]、穿越平台次数减少（2．8±0．9与5．2±O．8，P〈0．05）、正确反应率提高[（38．5±9．2）％与（64．9±7．9）％，P〈0．05]。结论：抑制mTOR信号通路能改善由慢性脑缺血所致的学习记忆功能下降，其机制可能与抑制细胞凋亡和自噬相关。

关键词：自噬 细胞凋亡 疾病模型 动物 

单位：浙江大学城市学院医学院; 浙江杭州310015