摘要：目的：通过分析不同的体积量甲醛固定液对荧光原位杂交（FISH）法检测乳腺原发性浸润癌人类表皮生长因子受体2（HER2）基因扩增的差异，为建立和优化乳腺癌HER2基因扩增检测过程中的标本固定方法提供实验依据。方法：选取中山市博爱医院2014年6月至2016年10月手术切除乳腺原发性浸润癌109例，同一肿瘤病变部位切取组织七块，根据随机数字表分为A、B、C、D、E、F、G组。使用4％中性（磷酸盐缓冲）甲醛作为固定液，从A组到G组固定液量与所浸泡组织体积的比例分别为3：1、6：1、9：1、10：1、15：1、20：1、25：1，固定15h后制作石蜡切片。采用FISH法检测HER2基因扩增，观察各组HER2基因扩增结果的差异。结果：在荧光显微镜下，A、B、C组的组织轮廓较模糊，出现细胞碎片，部分探针定位欠佳，出现信号丢失、核发空现象，见明亮的桔红／绿色荧光信号；D、E、F、G组的组织轮廓清晰而完整、背景洁净、探针定位准确，见耀眼的桔红／绿色荧光信号。A～D组基因扩增阳性率逐渐增高（X2=8．601，P〈0．01），D-G组基因扩增阳性保持稳定；固定液量与所浸泡组织体积的比例在10：1以下（A、B、C组）时，HER2基因扩增状态不稳定。随着固定液量的增加不断出现新的基因扩增阳性患者；固定液量与所浸泡组织体积的比例在10：1,72．以上（D、E、F、G组）时，HER2基因扩增阳性率稳定在24．77％；D、E、F、G组的基因扩增阳性率高于A、B、C组（均P〈0．05）。结论：采用FISH法检测乳腺原发性浸润癌HER2基因扩增，固定液的量要保证至少是所浸泡组织体积的10倍以上方可获得确切而稳定的实验结果。

关键词：肿瘤浸润 固定剂 原位杂交 荧光 受体 

单位：南方医科大学附属中山市博爱医院病理科; 广东中山528400