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缺氧对人牙周膜细胞增殖、迁移能力及IGF-1表达的影响

谢佳颖; 尹东青 重庆医科大学学报 2019年第05期

摘要:目的:探讨缺氧对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)生物学活性的影响。方法:选择第 5 代hPDLCs,在严重缺氧(1% O2)、轻度缺氧(5% O2)和常氧(21% O2)3 种环境下培养,用 MTT 法评价细胞增殖率,用倒置显微镜观察细胞形态变化,细胞划痕试验评价细胞迁移能力,用免疫荧光染色染色研究细胞中低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)的表达及分布情况,用 RT-PCR 及 Western blot 检测 HIF 和 IGF-1 在不同氧浓度环境下的 mRNA 及蛋白表达水平。结果:①与正常 hPDLCs 相比,在 1% O2 浓度下,hPDLCs 的数量在一个显微镜视野下明显减少,排列稀疏,结构发生改变。②hPDLCs 的增长速率随着氧浓度的下降而减少,氧气浓度越低,增殖速率越慢。③在划痕处理后 72 h,在 3 组不同氧浓度下,hPDLCs 均向划痕区域迁移,但严重缺氧组的移动速率明显小于轻度缺氧和常氧组(划痕 72 h:1% O2 组 0.917±0.023,5% O2 组0.742±0.046,21% O2 组 0.453±0.039,F=530.237,P=0.002)。④HIF/DAPI 染色结果显示在常氧条件下,HIF-1 主要表达在细胞质中,随着氧气浓度降低,HIF 逐渐转移至细胞核内。结论:缺氧能够抑制人牙周膜细胞的增殖和迁移能力,改变 hPDLCs 的形态。在缺氧条件下,HIF 从细胞质转移到细胞核中,HIF 和 IGF-1 的表达增加,提示缺氧微环境对人牙周膜细胞的生物学活性有一定影响。

关键词:缺氧人牙周膜细胞细胞增殖细胞迁移

单位:重庆医科大学附属口腔医院修复科、口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室; 重庆401147

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