摘要：目的 建立缺氧／复氧诱导体外培养的人肥大心肌细胞模型并观察凋亡情况。方法 用0．2％胰蛋白酶(trypsin)和0．1％胶原酶(collagenase)进行消化，用差速粘附贴壁法、Brdu加入和人为破坏成纤维细胞法纯化心肌细胞，用IMDM(Iscove’s改良的Dulbecco’smedium)培养基培养，4～6d后将体外培养的人肥大心肌细胞置于92％氮气及5％二氧化碳孵箱中，6、12、24、48h缺氧后再恢复正常条件培养4h，造成缺氧／复氧损伤所致细胞凋亡模型，分别用倒置显微镜、电镜、TUNEL法技术检测凋亡发生的情况。结果 心肌细胞经历缺氧／复氧损伤后，倒置显微镜、电镜、TUNEL染色均观察到凋亡阳性细胞。TUNEL法定量检测，心肌细胞缺氧培养6、12、24、48h后复氧4h，其凋亡率分别为：(4．5±1．5)％、(10．1±2．0)％、(17．3±2．3)％和(18．4±1．9)％。结论 缺氧／复氧一定时间可以诱导体外培养的人肥大心肌细胞凋亡，心肌细胞凋亡率随着缺氧时间的延长而增高。

关键词：人肥大心肌细胞 细胞培养 细胞凋亡 

单位：第三军医大学新桥医院心内科，重庆400037; 第三军医大学新桥医院心外科，重庆400037