摘要：目的 克隆人趋化因子MIP-3alpha基因，表达并初步纯化MIP-3alpha融合蛋白。方法 从人扁桃体中提取总RNA，再进行RT-PCR，扩增MIP-3alpha成熟蛋白基因，并在5’和3’端分别添加NcoI和EcoRI酶切位点，通过与之对应的存在于pET32a（＋）质粒上的酶切位点重组于pET32a（＋）载体上，转化E．coli BL21trxB（DE3），筛选阳性克隆，酶切鉴定，DNA测序检测插入序列的正确性，缺失突变MIP-3 alpha序列前端多余碱基，获得MIP-3 alpha天然蛋白表达载体pET32a（＋）／MIP-3 alpha，SDS-PAGE分析其表达，Western Blot验证融合蛋白。大量表达并初步纯化MIP-3 alpha融合蛋白。结果 成功克隆了MIP-3 alpha基因，表达并初步纯化得到MIP-3 alpha融合蛋白。结论 在大肠杆菌中成功构建的MIP-3 alpha硫氧还蛋白融合表达栽体，以可溶性蛋白的方式表达MIP-3 alpha硫氧还蛋白。

关键词：alpha 融合表达 蛋白纯化 

单位：第三军医大学西南医院综合实验研究中心; 重庆400038