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抑制低氧诱导因子活性的转录载体pTZU6+1RNAi系统的构建

曾波; 姜政; 向廷秀; 黄爱龙; 王丕龙 重庆医学 2006年第14期

摘要:目的构建抑制低氧诱导因子(HIF-1a)活性的shRNA表达载体,为进一步探讨其对HIF-1a基因表达的抑制作用。方法设计并合成2对HIF-1a编码基因的反向重复序列,中间分别间隔4nt和8nt,分别定向克隆至载体pTZU6+1的U6转录启动子下,构建pshRNA-HIF-1a1和pshRNA-HIF-1a2重组质粒。结果构建的pshRNA-HIF-1a1和pshRNA-HIF-1a2重组载体经双酶切鉴定及插入基因片段序列分析,成功地将目的基因片段插入到预计位点,并且与实验设计完全一致。结论重组载体的成功构建,为进一步研究pshRNA—HIG1a对HIF-1a活性的抑制作用和基因功能的分析、肿瘤的治疗等奠定了基础。

关键词:shrnarnai低氧诱导因子

单位:重庆医科大学附属第一医院消化科; 400016; 重庆医科大学病毒性肝炎研究所; 400010

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