摘要:目的构建人趋化因子受体6(CCR6)cDNA序列的真核表达载体.并在HEK293细胞中表达.为研究CCR6生物学功能和筛选CCR6拮抗剂奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人扁桃体克隆CCR6受体的DN段.并将该片段插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3、1(+)-CCR6;将该质粒pcDNA3、1(+)-CCR6转染HEK293细胞.用流式细胞术检测转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞;采用体外趋化实验、钙流实验,验证转染pcDNA3.1(-).CCR6质粒的HEK293细胞表面表达的CCR6的生物学活性。结果经RT-PCR获得了编码人CCR6受体的DN段.构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6:转染HEK293细胞.经流式细胞仪检测、趋化实验、钙流实验证实.表达CCR6的HEK293细胞具有趋化因子受体CCR6的生物学活性。结论重组人趋化因子受体CCR6克隆成功.并在HEK293细胞中获得了表达.为研究CCR6的生物学功能及筛选CCR6拮抗剂奠定了基础。
关键词:人趋化因子受体6 趋化实验 钙流实验 克隆
单位:第三军医大学西南医院综合实验研究中心; 重庆400038
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