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重组腺病毒AD—PTEN转染肾脏成纤维细胞对其细胞周期的影响

聂凌; 杨惠标; 祝善俊; 徐颖; 袁发焕 重庆医学 2007年第05期

摘要:目的将携带有PTEN基因的重组腺病毒转染大鼠肾脏成纤维细胞,观察其过度表达PTEN对细胞周期的影响。方法以免疫组化的方法确定PTEN在成纤维细胞中的亚细胞定位,以Ad—PTEN转染成纤维细胞,荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况及亚细胞定位,将转染的成纤维细胞及正常对数生长期成纤维细胞消化,流式细胞仪分别检测细胞周期。结果免疫组化结果显示成纤维细胞的胞浆和胞核中均有PTEN的表达,在胞核中表达水平更高,荧光倒置显微镜下观察Ad—PTEN转染成纤维细胞后外源性PTEN其标志物绿色荧光蛋白(GFP)在胞浆和胞核中均表达,其中胞核表达水平更高,流式细胞仅检测在成纤维细胞中病毒转染组G1/S均明显高于对照组,提示Ad—PTEN转染组细胞存在明显的G1期细胞阻滞。结论PTEN过度表达将引起。肾脏成纤维细胞周期G1期阻滞,这一过程与PTEN在细胞核定位有关。

关键词:肾脏成纤维细胞pten细胞周期细胞核

单位:第三军医大学新桥医院肾内科; 重庆400037; 第三军医大学新桥医院心内科; 重庆400037; 第三军医大学新桥医院药理基地; 重庆400037

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