摘要：目的构建含人APE1／Ref-1基因全长cDN段的真核表达质粒pcDNA3．1^＋ APE1，以期进一步研究该基因对细胞DNA损伤的保护作用。方法采用RT-PCR法定向克隆人APE1／Ref-1基因全长cDN段，构建pGM-T Easy／APE1质粒，测序鉴定APE1／Ref-1基因cDNA序列正确后，将目的片断亚克隆至真核表达载体pcDNA3．1^＋上，构成pcDNA3．1^＋APE1表达质粒，并用Western blotting法检测转染人脐静脉内皮细胞APE1／Ref-1蛋白的表达水平。结果经酶切及测序证实APE1／Ref-1基因真核表达质粒pcDNA3．1^＋APE1构建成功，Western blotting法检测到转染pcDNA3．1^＋APE1后，细胞内APE1／Ref-1蛋白表达明显增加。结论成功构建含人APE1／Ref-1基因全长cDN段的真核表达质粒，为探讨APE1／Ref-1对细胞电离辐射损伤的保护作用奠定了基础。

关键词：真核表达载体 dna损伤 电离辐射 

单位：重庆武警总队医院肿瘤中心; 400061; 第三军医大学大坪医院肿瘤中心; 重庆400042