摘要:目的构建糖皮质激素受体α(GRα)小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,并检测其抑制结肠癌细胞株Lovo中糖皮质激素受体α表达的效果。方法根据基因文库中GRα的cDNA序列,设计并合成两段siRNA,分别插入到pGenesil-1质粒中,并对重组质粒(命名为pGenesil-1/GRα1和pGenesil-1/GRα2)进行测序鉴定。脂质体介导下转染LOVO细胞株,RT-PCR和Western Blot检测转染后GRα的表达。结果成功构建GRαsiRNA真核表达载体(pGenesil-1/GRα1和pGenesil-1/GRα2);pGenesil-1/GRα2转染(脂质体法)Lovo细胞后,RT-PCR和Western blot检测细胞内GRα的表达显著降低。结论GRαsiRNA真核表达载体的成功构建为进一步研究GR在结肠癌化疗中的作用奠定了重要的实验基础。
关键词:小干扰rna 结肠癌
单位:第三军医大学西南医院肿瘤科; 重庆400038; 解放军63850部队医院; 吉林白城137001
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社