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IDO基因转染对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭和转移的影响研究

谢启超; 王玲俐; 朱波; 王亚丽; 顾健滕; 陈正堂 重庆医学 2007年第20期

摘要:目的探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamin-2,3-dioxygenase,IDO)基因转染对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭和转移能力的影响,并对其机制进行初步探讨。方法通过基因转染技术,利用阳离子脂质体将含有人全长ID0基因序列的真核表达质粒pEGFP—IDO转染到小鼠Lewis细胞,G418筛选获得Lewis—IDO细胞,设置空白对照组(Lewis细胞)及空质粒转染组(Lewis-EGFP细胞),观察细胞形态学改变,利用transwell侵袭小室检测3种细胞侵袭能力,将3种细胞分别种植到C57/LB小鼠,检测不同细胞种植瘤和转移灶的形成、小鼠外周血中调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的增殖。结果与Lewis—EGFP细胞和Lewis细胞相比,Lewis—IDO细胞贴壁比例增加,形态变为长梭形,伪足明显增多延长,前二者形态相似;Lewis—IDO细胞侵袭能力增强,破坏matrigel基质蛋白胶层进入下室内的细胞数明显增多,Lewis—IDO细胞、Lewis-EGFP细胞及Lewis细胞分别为237.4±22.1、166.0±14.2和185.6±19.5,前者与后二者比较差异具有统计学意义(P〈0.05);种植Lewis—IDO、Lewis—EGFP及Lewis细胞的小鼠发生肝肺转移的小鼠数量及转移灶分别为12只44处、5只7处及4只7处,前者与后二者比较具有统计学意义(P=0.01);流式细胞术分析,种植Lewis—IDO细胞的小鼠外周血中Treg细胞比例明显高于Lewis—EGFP细胞组和Lewis细胞组,其比例分别为(13.7±4.5)%、(8.9±3.3)%和(9.2±3.4)%,前者与后二者比较差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论IDO基因转染能改变Lewis细胞的培养形态,可以明显增强Lewis细胞的侵袭能力和转移能力,其机制可能与ID0对Lewis细胞形态学改变及诱导Treg细胞的增殖有关。

关键词:ido肺癌侵袭调节性t细胞转移

单位:第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所; 重庆400037

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