摘要：目的利用RNA干扰稳定筛选抑制技术，抑制人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因表达．探讨靶向hTERT基因RNAi对肝癌细胞增殖的抑制效应。方法设计靶向hTERT基因的小干扰RNA，构建重组表达质粒pGenesil-shRNA-hTERT并导入人肝癌细胞系QGY细胞株，经G418筛选，建立稳定表达siRNA-hTERT的细胞株。采用real time RTPCR、MTT和PCR—TRAP法同时检测pGenesil—shRNA—hTERT稳定抑制纽和未处理QGY细胞组hTERT基因表达、端粒酶活性及细胞增殖变化。结果在稳定表达pGenesil-shRNA-hTERT的QGY细胞株中，RNAi效力持续、稳定存在，hTERT的mRNA表达、端粒酶活性明显降低，瘤细胞增殖被抑制。结论RNA干扰能持续、稳定地抑制靶基因hTERT的mRNA表达及肿瘤细胞增殖，是潜在的肿瘤基因治疗新方法。

关键词：rnai 肝癌细胞株 htert 稳定抑制 质粒 

单位：重庆市第九人民医院肿瘤科; 400700; 重庆医科大学核医学教研室; 400016