摘要：目的构建含全长产气荚膜梭菌肠毒素（CPE）基因的重组表达质粒pET-28a—CPE并进行原核表达。方法培养并提取表达肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615的基因组DNA，PCR扩增出全长CPE基因片段并连接入pET28a载体质粒中，构建重组原核表达质粒pET-28a—CPE，进行酶切及测序鉴定，并转化入感受态大肠杆菌（E．coli）BL21中，用IPTG诱导CPE表达。结果复苏、培养成功产肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615，成功构建了表达质粒pET-28aCPE，经酶切及测序鉴定结果与设计的完全相符，成功用E．coliBL21进行了原核表达，目的蛋白CPE占总表达蛋白45．37％。结论本实验成功构建并表达了含CPE的重组质粒pET-28a-CPE，为进一步观察CPE对前列腺肿瘤等的生物学作用奠定了基础。

关键词：产气荚膜梭菌肠毒素 表达 pet 28a 前列腺癌 

单位：第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科 重庆400042