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诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究

陈小菊 王嫣 王兰 左国伟 寇小琴 谭启华 周兰 冯涛 重庆医学 2009年第10期

摘要:目的明确大鼠骨髓间充质干细胞(bone mensenchymal stem cells,BMSCs)在体外全骨髓培养条件下的生物学特性及其向成骨细胞分化的能力,探索更为简便有效的BMSCs体外培养方法。方法提取大鼠原代BMSCs,用αMEM完全培养基和成骨诱导条件培养基体外培养,倒置相差显微镜和HE染色观察细胞形态;台盼蓝活细胞计数绘制细胞生长曲线;ALP检测试剂盒检测ALP含量变化和von Kossa染色检测细胞矿化结节,以判断细胞是否向成骨细胞分化。结果全骨髓培养法在体外培养的大鼠原代BMSCs贴壁生长,呈梭形或多角形;使用Dex-SaMEM向成骨诱导后的BMSCs具有与成骨细胞在体外培养时相似的特征,倍增时间延长;合成ALP能力显著增强(P〈0.05),von Kpssa染色出现阳性的棕褐色或棕黑色团块的钙化结节。结论全骨髓培养法取材方便,经成骨诱导培养的BMSCs表现出成骨细胞的形态特征和生物学特性,该方法可作为骨组织工程种子细胞培养的常规方法。

关键词:骨髓间充质干细胞成骨诱导组织工程

单位:重庆医科大学护理学院 400016 重庆市超声医学工程重点实验室 400016 英国剑桥大学生物工程学研究所 英国CB21QT UK 重庆医科大学检验系 400016 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室 400016

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