摘要：目的建立改良Boyden趋化小室（Boydenchamber）法检测巨噬细胞趋化功能的方法，探讨皮质酮对大鼠腹腔巨噬细胞趋化功能的影响。方法分离成年Sprague—Dawley（SD）大鼠腹腔巨噬细胞。应用48孔Boydenchamber趋化板检测趋化功能。下室加入27μL的10nMFMLP作为趋化剂或含1％牛血清清蛋白的RPMI一1640作为阴性对照，将50μL不同细胞密度的大鼠腹腔巨噬细胞悬液（3、6、12×10^6／mL）置于上室以确定最适细胞密度，将趋化装置置于5％C02、37℃细胞培养箱内孵育2、3h以确定最适孵育时间。同时，以0、10、50、1000ng／mL皮质酮处理大鼠腹腔巨噬细胞，应用Boydenchamber法检测巨噬细胞趋化功能。结果巨噬细胞对10nMFMLP趋化剂呈细胞密度依赖性增加，上室巨噬细胞密度为6×10^6／mL时为最适细胞密度，并且最适孵育时间为3h。低浓度皮质酮（10、50ng／mL）处理大鼠腹腔巨噬细胞其趋化指数显著高于对照组（P〈0．01），而高浓度皮质酮（1000ng／mL）处理后巨噬细胞趋化指数与对照组相比差异不明显。结论成功建立了改良Boydenchamber法检测巨噬细胞趋化功能方法，皮质酮可呈剂量依赖性地影响巨噬细胞趋化功能，在无免疫刺激状态下，低浓度皮质酮能增强巨噬细胞趋化功能。

关键词：趋化检测 巨噬细胞 皮质酮 

单位：第三军医大学新桥医院麻醉科 重庆400037 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室／全军交通医学研究所／全军交通伤重点实验室／创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室 重庆400042