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人胸腺素β4基因对人肾小管上皮细胞转分化的影响

张璟 郑颖 敖绪军 重庆医学 2009年第17期

摘要:目的研究胸腺素β4基因对人肾小管上皮细胞株(HKC)上皮-肌成纤维细胞转分化(EMT)的影响。方法采用RT-PCR和T-A克隆技术,从SW480细胞中扩增胸腺素β4基因全长cDNA,克隆到T载体中,再亚克隆到pIRES2-EGFP质粒载体,得到表达胸腺素β4基因的真核表达载体和阴性对照载体,转染HKC,得到胸腺素β4表达增强的HKC-Tβ4。和胸腺素β4表达未受影响的HKC—EGFP。分别采用RT-PCR和Westernblot检测HKC、HKC-Tβ4。和HKC-EGFP3组细胞胸腺素β4、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素表达。结果与HKC组及HKC—EGFP组相比,HKC-Tβ4组胸腺素β4和α-SMA表达显著增高,E-钙黏素表达显著降低,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论胸腺素β4基因转染能诱导HKC发生EMT,提示胸腺素β4是诱导EMT的重要分子,可能成为肾纤维化治疗的靶目标。

关键词:人肾小管上皮细胞肌成纤维细胞真核表达载体转分化

单位:第三军医大学新桥医院肾内科 全军肾脏病中心 重庆市肾病研究所 重庆400037

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