摘要:目的纯化人绒毛膜促性腺激素(HCG)α亚单位.制备其多克隆抗体,为进一步研究其功能及临床诊断应用奠定基础。方法将临床医用注射HCG纯品经尿素处理后,上分子筛分离HCG-α。经纯化、鉴定后,用HCG—α亚单位免疫新西兰兔,分离抗血清,通过rProtein A纯化IgG抗体.随后采用HCG-α及HCG-β制备的抗原亲和层析柱提高IgG多抗的特异性,用ELISA法测定其抗体效价。结果纯化的蛋白经SDS-PAGE电泳显示单一条带,大小与HCG-α相应分子质量相同。HCG-α多抗效价达1:1000000,降低了与HCG-β的交叉反应。结论建立了简单易操作的分离HCG-α亚单位的方法,并制备了高特异性、高效价的α亚单位多克隆抗体。
关键词:分子筛 免疫亲和层析 绒毛膜促性腺激素 纯化 多克隆抗体
单位:中国人民解放军第149医院检验科 连云港222042 第三军医大学检验系临床生物化学教研室 重庆400038
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