摘要：目的观察靶向骨桥蛋白（OPN）的反义寡核苷酸（ASODN）对微缺氧下HT-29细胞增殖活性、侵袭转移潜能等的影响,探讨OPN与微缺氧诱导的肿瘤恶性表型的关系。方法合成ASODN,以Lipofectamine为载体,将其转染入微缺氧下高表达OPN的HT-29细胞。用RT-PCR和Western blot法分别检测转染细胞微缺氧下OPN mRNA和蛋白的表达,MTT检测转染的HT-29细胞微缺氧下的增殖活性,MTT比色试验测定HT-29细胞的异质性黏附能力,明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2/9活性变化。结果微缺氧诱导的OPN mRNA和蛋白表达被靶向OPN的ASODN特异性地抑制,表达量分别是对照组的31.5%和35.4%。ASODN组HT-29细胞的吸光度值（A570）明显低于各对照组（P〈0.01）,生长抑制率（IR）达（41.6±1.2）%。ASODN组HT-29细胞在各时限点的黏附率均明显降低,明胶酶活性下降71%,与各对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论靶向OPN的ASODN明显抑制微缺氧诱导的OPN mRNA和蛋白表达,显著拮抗微缺氧诱导的细胞增殖、异质性黏附,并显著下调微缺氧诱导的细胞分泌MMP2/9的活性。OPN在微缺氧促进肿瘤向恶性表型转化中起着重要作用。

关键词：微缺氧 反义寡核苷酸 骨桥蛋白 恶性表型 

单位：泸州医学院附属医院普外科 四川646000 泸州医学院护理学院卫校 四川646000