摘要：目的表达幽门螺杆菌（H.pylori）重组1188蛋白,为研究幽门螺杆菌的黏附机制奠定基础。方法用聚合酶链反应（PCR）技术从H.pylori标准株NCTC 11637的基因组DNA中扩增hp1188基因片段,插入原核表达载体pQE-30,构建重组载体pQE30-hp1188,经DNA测序分析确认后,转化大肠杆菌DH5α,异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达。Ni2＋-NTA树脂纯化表达蛋白,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析表达形式和表达量。结果重组表达质粒pQE30-hp1188构建成功,所得序列完整,插入的基因片段全长810 bp,与基因文库中的hp1188基因同源性达98%。SDS-PAGE显示表达产物相对分子质量约为30.6 kD,与预期一致,蛋白表达量占全菌总蛋白的47%,上清液和沉淀中均有表达,重组蛋白纯化后纯度达90%以上。结论成功克隆hp1188基因,并在大肠杆菌DH5α中获得高效表达。

关键词：螺杆菌 幽门 hp1188基因 克隆 表达 

单位：重庆三峡中心医院微生物免疫科 万州404000 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室 400016