摘要：目的 在人肝癌细胞（HepG-2细胞）中研究纺锤体检查点蛋白E（Cenp-E）的定位和作用.方法 用流式细胞术检测经诺考达唑处理后HepG-2细胞和正常肝细胞（LO2细胞）周期的变化,用染色体分析方法检测两种细胞染色体数量及核型,用实时荧光定量-聚合酶链反应（RFQ-PCR）检测经诺考达唑处理后HepG-2细胞和 LO2 细胞中Cenp-E mRNA 的表达水平,用间接免疫荧光技术观察两种细胞Cenp-E蛋白表达及定位,在LO2细胞中用 RNA干扰（RNAi）技术进一步评价Cenp-E蛋白的功能.结果 诺考达唑处理后,使两种细胞有丝分裂均停留在G2/M期;染色体分析结果显示HepG-2 细胞中染色体数目异常细胞的比例高于 LO2 细胞（P〈0.05）;RFQ-PCR显示诺考达唑处理后LO2细胞Cenp-E mRNA高于HepG-2 细胞（P〈0.05）;间接免疫荧光技术显示Cenp-E定位于细胞核,诺考达唑处理后LO2细胞Cenp-E蛋白表达高于HepG-2细胞（P〈0.05）;转染质粒后,LO2细胞中Cenp-E mRNA和蛋白的表达明显降低（P〈0.05）.结论 Cenp-E 过低表达可能是肝癌细胞染色体数目异常重要原因之一.

关键词：肝肿瘤 染色体 纺锤体检查点蛋白e 

单位：南华大学附属第二医院 湖南衡阳421001 重庆医科大学检验系 400016