摘要：目的分离鉴定在肝癌细胞HepG2和Hep3B中与骨桥蛋白（OPN）5′非翻译区（5′-UTR）结合后在转录后水平调节OPN mRNA的稳定性的mRNA结合蛋白。方法利用亲和纯化的方法分离和纯化OPN 5′UTR结合蛋白,质谱分析消化后的片段以鉴定蛋白;Hep3B细胞瞬时转染真核细胞翻译延长因子1A（EF1A）siRNA抑制EF1A,HepG2细胞瞬时转染（pcDNA3.1＋EF1A）质粒过表达EF1A,Western blot检测OPN蛋白的表达,real-time PCR检测OPN mRNA半衰期的变化。结果质谱分析法确认此结合蛋白为EF1A。在HepG2细胞中过表达EF1A能通过加速OPN mRNA的降解而降低OPN表达;在Hep3B细胞中利用siRNA技术下调EF1A的表达能增强OPN mRNA的稳定性,进而增强OPN的表达。结论 EF1A作为一个去稳定因素作用于OPN 5′UTR,至少部分决定了Hep3B和HepG2细胞中OPN的表达。

关键词：癌 肝细胞 肽链延伸 翻译 rna稳定性 

单位：郑州人民医院消化内科 郑州450003 郑州大学第一附属医院消化内科 郑州450052