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3种不同类型基因导入系统转染类神经元细胞的效率比较

梁兵 袁芳 杨宁 殷建瑞 蒲蜀湘 解龙昌 高庆春 高聪尬 重庆医学 2012年第18期

摘要:目的应用3种不同类型基因导入系统携带能表达绿色荧光蛋白的pAAV—EGFP质粒转染两类神经元细胞株,并对细胞毒性和转染效果进行比较。方法LipofectAMINE2000、聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI,相对分子质量为25×10^3)及该课题组合成的PEI-聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)4.6在SH—sY5Y神经母细胞瘤细胞和c6胶质瘤细胞中的转染效果,通过MTT法检测细胞存活率,倒置显微镜荧光观察法和流式细胞仪法检测转染效果。结果MTT检测发现,在c6胶质瘤细胞中,PEG-PEI4.6的细胞存活率为83%,比PEI(70%)和LipofectAMINE2000(73%)的细胞存活率要高(P<0.05);但LipofectAMINE2000和PEI的细胞存活率比较,差异无统计学意义(P〉0.05);在sH—sY5Y神经母细胞瘤细胞中的检测结果与C6胶质瘤细胞类似。倒置显微镜观察发现,在c6胶质瘤细胞中,PEG-PEI4.6的细胞荧光表达效果比LipofectAMINE2000和PEI要好;而在SH—SY5Y神经母细胞瘤细胞中,LipofectAMINE2000的荧光表达效果比另外两种复合物的效果好,同时PEG-PEI4.6的荧光表达效果比PEI要好。流式细胞仪检测发现在C6胶质瘤细胞中,PEG-PEI4.6的转染效率最好,为23.2%;Lipo—fectAMINE2000其次,为16.9%;PEI最差,为12.6%,三者两两比较差异有统计学意义(Pdo.05)。在SH—SY5Y神经母细胞瘤细胞中则是LipofectAMINE2000的转染效率最好,PEG-PEI4.6其次,PEI最差,转染效率分别为22.3%、17.2%、10.6%,三者两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论LipofectAMINE 2000和PEG-PEI4.6都可作为目前神经系统基因转染的传输载体。

关键词:神经胶质瘤神经母细胞瘤脂质体转染

单位:广州医学院第二附属医院神经科学研究所/神经内科 广州510260 广州医学院第五附属医院神经内科 广州510700

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