摘要：目的构建携带人金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMPl）的重组腺病毒AdV—hTIMPl，感染体外培养的人脐静脉内皮细胞CRL-1730，观察其mRNA表达情况。方法应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统在大肠埃希菌BJ5183中通过同源重组构建Ad—hTIMPl和对照Ad—Track。阳离子脂质体法将重组腺病毒转染到人胚胎肾细胞（HEK293T）中进行包装和扩增。纯化后PCR鉴定hTIMPl目的基因，OD260法测定滴度，透射电镜观察腺病毒形态。将人脐静脉内皮细胞CRL-1730分为3组，空白对照组、Track对照组和T1MPl实验组，感染48h后收集细胞，半定量PCR（RT—PCR）法检测内皮细胞中T1MPlmRNA的表达情况。结果重组腺病毒Ad-hTIMPl的滴度为1．9×1012v．p／mL。其感染人脐静脉内皮细胞CRL-1730后，实验组TIMPlmR～NA的表达明显升高（P〈O．05）。结论成功构建了携带hTIMPl基因的重组腺病毒Ad-hTIMPl，成功感染了体外培养的人脐静脉内皮细胞CRL-1730，使细胞中hTIMPl过表达，为心血管疾病的基因治疗提供平台。

关键词：腺病毒 人 金属蛋白酶组织抑制剂1 基因治疗 

单位：天津医科大学 300070 天津市胸科医院 300051