摘要：目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5（Cdk5）在高糖刺激体外培养小鼠足细胞中的表达及抑制Cdk5表达对高糖诱导足细胞凋亡的影响。方法（1）体外培养条件性小鼠足细胞，分为正常糖组、甘露醇组、高糖组，高糖组按不同刺激时间分为0、6、12、24、48h5组，应用蛋白质印迹（Westernblot）法检测足细胞中Cdk5蛋白表达水平。（2）应用Cdk5miRNA干扰质粒抑制足细胞中Cdk5基因的表达水平。分别设立：NG组（正常糖）；HG组（高糖）；HG＋S组（高糖十Scrambled阴性质粒）；HG＋C组（高糖＋Cdk5miRNA质粒）。以上各组细胞培养48h后，应用流式细胞术和末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记（TUNEL）法检测足细胞凋亡水平，Westernblot法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤／白血病一2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和分裂型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleavedcaspase-3）的蛋白表达水平。结果与正常糖组相比，高糖刺激后，足细胞中Cdk5的蛋白表达水平明显增加（P〈0．05）。Cdk5miRNA干扰质粒能显著抑制足细胞中Cdk5的表达水平。与HG组和HG＋s组相比，HG＋C组足细胞凋亡率显著降低（P〈0．05），凋亡相关蛋白cleavedcaspase-3蛋白表达水平和Bax／Bcl-2蛋白表达比率也有明显降低（P〈0．05）。结论高糖刺激可以增加足细胞中Cdk5蛋白的表达水平；抑制Cdk5表达可以降低高糖刺激诱导的足细胞凋亡。

关键词：细胞周期素依赖性蛋白激酶5 糖尿病肾病 足细胞 细胞凋亡 

单位：河北医科大学诊断学教研室 石家庄050017 河北省保定市传染病医院介入科 070000 河北医科大学病理学教研室 石家庄050017