摘要：目的：构建含有与溶酶体膜蛋白2（LAMP-2）P41-49完全同源序列的尿路致病性大肠杆菌（UPEC）Ⅰ型菌毛FimH1-156为目的基因的原核载体，表达并纯化FimH1-156融合蛋白。方法采用PCR克隆pPKL241质粒获取 FimH1-156基因，插入原核表达载体pET28a（＋）；将重组表达质粒转染感受态 E ．coli BL21（DE3），经IPTG诱导表达 FimH1-156融合蛋白，超声裂解细菌，Ni-NTA层析法进行纯化，聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析、蛋白免疫印迹法（Western blot）对其进行鉴定。结果成功构建表达载体，经对融合蛋白表达条件的优化，在IPTG 浓度为1 mmol/L ，诱导4 h目的蛋白表达量最高，主要以包涵体形式存在；Western blot证实该FimH1-156融合蛋白可与抗6×His单克隆抗体发生结合反应。结论成功克隆FimH1-156融合蛋白表达基因并构建至原核表达载体，获得了包涵体纯化的Fim H1-156融合蛋白，为下一步建立实验动物模型奠定了基础。

关键词：fim h1 融合蛋白 表达 纯化 

单位：第三军医大学新桥医院肾内科 重庆400037 第三军医大学全军免疫研究所 重庆400038