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Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装及鉴定

李亚文 徐世元 张庆国 李乐 赖露颖 郑艇 苏娇玲 杨耐梅 李元涛 重庆医学 2014年第15期

摘要:目的:探讨Grp78基因过表达慢病毒载体的构建、包装和滴度检测。方法采用慢病毒载体,运用基因工程技术,获取目的基因片段并构建重组质粒,然后制备感受态细胞并转化,将重组质粒导入感受态细胞;用PCR技术鉴定阳性克隆和进行DNA序列分析及对慢病毒包装和滴度检测。结果阳性克隆测序比对结果说明测通。熔解曲线中既没出现杂峰也没出现主峰的异常增宽,表明实验中未出现污染、引物二聚体和非特异性扩增。结论Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装成功。

关键词:grp78基因慢病毒载体基因工程

单位:南方医科大学珠江医院麻醉科 广州510282 南方医科大学附属深圳妇幼保健院麻醉科 广东深圳518028

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