摘要：目的：构建人IL‐4重组表达载体，表达纯化并鉴定人IL‐4重组蛋白。方法采用巢式PCR技术从健康志愿者外周血单核细胞（PBMC）总RNA中扩增人IL‐4开放阅读框基因，将扩增的IL‐4目的基因与表达质粒pET101/D‐TOPO连接，转化大肠杆菌BL21，进行表达纯化和鉴定。结果采用巢式PCR扩增得到IL‐4开放阅读框大小为460 bp ，测序比对显示序列正确。转化BL21后，通过对不同克隆子表达水平的筛选，筛选到高表达 IL‐4的克隆子，表达和纯化后聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS‐PAGE）显示，其融合蛋白大小约为28＆#215;103，与目的蛋白大小一致。Western blot鉴定结果显示表达的蛋白正确，为人IL‐4目的蛋白。结论成功表达纯化到人IL‐4重组蛋白。

关键词：人白细胞介素4 表达 纯化 

单位：泸州医学院基础医学院 四川泸州646000