摘要:目的构建人朊蛋白基因(PRNP)真核表达重组质粒。方法从阿尔茨海默病(AD)患者外周血白细胞中提取总RNA,利用RT—PCR的方法扩增编码人PRNP的基因片段,应用基因重组技术将人PRNP基因片段克隆到真核表达载体pEG—FP—N2中,经XhoI及EcoRI双酶切、单酶切及基因序列测定证实所构建的载体。结果RTPCR方法获得人PRNP的基因片段,限制性内切酶酶切分析、PCR法及序列测定证实为正确重组质粒,并且该重组载体能够在SHSYSY细胞中表达。结论构建的真核表达重组质粒pEGFP—N2-PRNP通过鉴定,结构正确,为后续研究PRNP的生物学功能奠定了基础。
关键词:阿尔茨海默病 朊蛋白基因
单位:海南医学院人体解剖学教研室 海口571101 海南省海口市人民医院骨科中心 570208
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