摘要:目的:研究腺相关病毒‐肝细胞生长因子K1(AAV‐HGFK1)对KRAS、BRAF野生型和突变型大肠癌细胞株的生长影响。方法选择人源的细胞株 KRAS和BRAF野生的SW48,KRAS突变的 Lovo ,KRAS突变且不表达表皮生长因子受体(EGFR)的SW620,BRAF突变的HT29,实时荧光定量PCR(RT‐PCR)测定EGFR基因转录水平,分别用5×104 vg/细胞的腺相关病毒(AAV)感染以上细胞株,荧光显微镜和流式细胞仪测定AAV‐EGFP感染率。加入或不加表皮生长因子(EGF)的情况下,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EGFR、磷酸化EGFR(p‐EGFR)和β‐actin ,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法测细胞增殖。结果Lovo和 HT29高表达EGFR ,而SW48表达EGFR较低,加入EGF促进了以上3种细胞的 EGFR磷酸化,AAV‐HGFK1抑制EGFR磷酸化,从而显著降低其增殖。EGF对SW620增殖无显著影响,但AAV‐HGFK1感染抑制了胎牛血清培养的SW620细胞。结论 AAV‐HGFK1可能直接作用于EGFR ,抑制其磷酸化从而阻断EGF促进细胞增殖,并可能通过其他通路对KRAS或BRA F基因野生或突变的大肠癌细胞都有抑制作用。
关键词:受体 表皮生长因子 大肠肿瘤 肝细胞生长因子k1 腺相关病毒
单位:南方医科大学南方医院消化科 广州510515
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