摘要:目的观察小干扰RNA(siRNA)沉默Livin基因对人乳腺癌细胞MCF-7细胞生物学影响及siRNA沉默MCF-7细胞Livin基因对4种化学治疗药物的增敏作用。方法 Lipofectamine 2000脂质体转染法转染MCF-7。分组:空白组(无转染)、脂质体组、反义组、错义组、联合组。MTT法测定氟尿嘧啶(5-FU)、表柔比星(EPI)、多西紫杉醇(DXT)、吉西他滨(GEM)单药(单药组)对乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用。免疫组织化学检测Livin蛋白在MCF-7细胞中的表达及转染联合化学治疗药物对Livin蛋白的表达变化。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测转染Livin siRNA后乳腺癌MCF-7细胞的Livin基因表达变化。同时利用Annexin-V检测乳腺癌细胞的凋亡及siRNA Livin联合5-FU、EPI、DXT、GEM诱导乳腺癌细胞凋亡的影响。结果 Livin在MCF-7细胞中高表达,4种化学治疗药物对Livin表达无明显影响,转染Livin基因48、72h后联合4种药物后能明显下调Livin蛋白表达,差异有统计学意义(P〈0.05)。5-FU、EPI、DXT、GEM治疗乳腺癌MCF-7细胞48、72h均能明显的引起细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。转染Livin基因48h联合4种药物后乳腺癌MCF-7细胞的凋亡率明显高于单药处理的细胞,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 siRNA沉默Livin基因能促进由化学治疗药物5-FU、EPI、DXT、GEM引起的细胞凋亡,具有化学治疗增敏作用。
关键词:rna 小分子干扰 乳腺肿瘤 livin基因 化学治疗增敏
单位:昆明医科大学第一附属医院乳腺外科 昆明650031
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