摘要:目的:研究IL‐1β对健康人支气管上皮细胞(HBE)高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达和释放的影响。方法培养HBE135‐E6E7,四唑盐(MTT)法检测不同浓度IL‐1β对支气管上皮细胞活力的影响,荧光定量PCR检测IL‐1β刺激HBE后HMGB1mRNA表达,双抗体夹心ELISA法检测细胞上清液中HMGB1水平,蛋白免疫印迹方法检测IL‐1β刺激HBE总蛋白、胞核、胞质HMGB1表达。免疫荧光观察IL‐1β刺激后对HBEHMGB1的移位的影响。结果0.1、1.0、10.0ng/mLIL‐1β刺激HBE24h对其活力无影响。IL‐1β以浓度和时间依赖性方式刺激HBE的HMGB1mRNA水平升高,IL‐1β增加HBE的HMGB1蛋白表达水平。在浓度依赖性实验,与对照组比较,1.0、10.0ng/mLIL‐1β刺激HBE24h后培养上清液HMGB1水平显著增加;在时间依赖性实验中,与对照组比较,10.0ng/mLIL‐1β刺激HBE12h、24h后细胞上清液中的HMGB1显著升高(P<0.05);10.0ng/mLIL‐1β刺激HBE24h后,HBE胞质蛋白明显增加,胞核蛋白减少。免疫荧光检测显示,HMGB1主要表达正常HBE的细胞核内,少量分布于细胞质,IL‐1β(10.0ng/mL)刺激HBE24h,HMGB1明显从HBE胞核向胞质转位。结论IL‐1β可以显著诱导支气管上皮细胞HMGB1的表达和主动释放,提示HMGB1可能参与了IL‐1β介导慢性气道炎症过程。
关键词:高迁移率族蛋白类 支气管上皮细胞 气道炎症
单位:广西医科大学第一附属医院西院呼吸内科 南宁530007
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