摘要：目的：制备高效价卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）病毒ORF65衣壳蛋白抗体并检测其特异性。方法将人工合成的ORF65蛋白抗原肽经弗氏佐剂乳化，在家兔背部、颌下等皮下多点免疫注射，间隔2周免疫，共4次。末次免疫后1周取兔血清，ELISA法检测兔免疫血清抗体IgG抗体水平。进一步采用免疫荧光、Western blot检测制备的抗血清中与ORF65结合的特异性。结果家兔在全程免疫后产生了高效价的特异性抗体，最高滴度达1∶12800。免疫荧光检测显示，与未经佛波酯（TPA）刺激的BCBL‐1细胞相比，兔抗血清主要结合于BCBL‐1细胞胞质，与ORF65蛋白在细胞内表达位置一致。Western blot结果显示在21 kD处有特异性蛋白条带，其大小与预期的ORF65蛋白大小相符，同时经T PA刺激的BCBL‐1细胞中ORF65蛋白表达量高于对照组，与ORF65蛋白裂解期蛋白的特性相符。结论用ORF65衣壳蛋白抗原肽段免疫家兔，可成功制备高效价的特异性抗血清，该抗体可与KSHV病毒ORF65蛋白特异性结合。

关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 orf65 抗体 免疫性 

单位：右江民族医学院微生物学与免疫学教研室 广西百色533000 右江民族医学院 广西百色533000