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环介导等温扩增法直接检测阳性血培养瓶中大肠埃希菌

任春阳 田杰 重庆医学 2015年第11期

摘要:目的应用环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种快速敏感的直接检测阳性血培养瓶中大肠埃希菌的方法。方法根据美国国立卫生研究院基因序列数据库(GenBank)上大肠埃希菌的lacZ(登录号:M74750)基因序列,设计4条特异引物(2条内引物、2条外引物),对lacZ基因进行扩增,对扩增反应进行优化。分别验证该方法的特异性及敏感性,并与传统培养法进行比较。结果在300份阳性血培养瓶中,采用LAMP法检测到68株大肠埃希菌,所设计引物对大肠埃希菌扩增的特异性及敏感性均较好,与传统培养法比较,灵敏度和特异性均达100%,但传统培养法的检出时间为3d,而LAMP法的检出时间只需1h。结论LAMP检测大肠埃希菌是快速、低成本、特异性强、灵敏度高的方法,适合临床开展。

关键词:环介导等温技术检测大肠埃希菌

单位:沈阳市第四人民医院检验科 辽宁沈阳110031

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