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髓核去细胞基质复合骨髓间充质干细胞体外构建组织工程髓核的研究

谭伟 吕海 曹纬 张朋 杨刘柱 周初松 重庆医学 2015年第23期

摘要:目的体外培养兔骨髓间充质干细胞(rBMSCs)-髓核去细胞基质支架(NPAMS)复合体(rBMSCs-NPAMS)构建组织工程髓核。方法制备若干NPAMS,接种BMSCs至NPAMS体外培养分为NPAMS组、实验组和正常对照组(正常髓核)。肉眼及显微镜观察复合体形态变化,并行扫描电镜(SEM)、苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学、实时定量PCR(qRT-PCR)、支架的生物力学等检测。结果肉眼下rBMSCs-NPAMS形态接近正常髓核;SEM显示细胞在支架表面大量黏附、并向深部迁移,表面细胞密度比横截面细胞密度大;HE染色表明随时间延长,rBMSCs-NPAMS内细胞量递增,分布更广泛;免疫组织化学显示细胞外基质2型胶原(CollagenⅡ)分泌量随时间递增,且实验组CollagenⅡ表达量大于NPAMS组,小于正常对照组;qRT-PCR结果:NPAMS组未提取到mRNA,实验组CollagenⅡ、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA相对表达量呈时间依赖性递增,但均小于正常对照组(P〈0.01),支架与正常髓核在相同位移下的压缩载荷差异无统计学意义(P〉0.05)。结论采用髓核体外NPAMS复合rBMSCs可成功构建组织工程髓核。

关键词:组织工程支架髓核去细胞骨髓间充质干细胞

单位:南方医科大学珠江医院骨科中心 广州510282

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