摘要:目的 观察TGF-β1在肾小球内皮细胞-间充质细胞转分化(EndMT)中的作用,探讨ILK介导TGF-β/Smad信号通路在EndMT过程中的作用。方法 以体外培养人肾小球内皮细胞为研究对象,分为空白对照组、TGF-β1 12.5、25.0、50.0ng/mL组、TGF-β1 50.0ng/mL+Ⅰ型受体抑制剂(LY364749)5.0μmol/L组和ILK抑制剂(QLT-0267)5.0μmol/L组,各组细胞在上述处理因素下培养48、72h,以RT-PCR测定P-Smad2/3和ILK mRNA的表达水平,以Western blot测定P-Smad2/3、ILK及E-cadherin、CD31、α-SMA和FSP-1蛋白的表达水平。结果 (1)TGF-β1可剂量依赖性诱导HGEnCP-Smad2/3和ILK mRNA水平显著升高(P〈0.01)以及P-Smad2/3、ILK、α-SMA和FSP-1蛋白水平显著升高(P〈0.01),但是剂量依赖性诱导E-cadherin和CD31蛋白水平显著降低(P〈0.01);(2)TGF-β1Ⅰ型受体抑制剂和ILK抑制剂可显著抑制TGF-β1诱导ILK mRNA水平的升高(P〈0.01)以及ILK、α-SMA和FSP-1蛋白水平的升高(P〈0.01),抑制E-cadherin和CD31蛋白水平的降低(P〈0.01);(3)TGF-β1Ⅰ型受体抑制剂可显著抑制TGF-β1诱导P-Smad2/3 mRNA和蛋白水平的升高(P〈0.01),但是ILK抑制剂对PSmad2/3mRNA和蛋白无显著影响(P〉0.05)。结论 TGF-β1可促进肾小球内皮-间充质细胞转分化,ILK作为下游效应因子介导TGF-β/Smad信号通路参与了该过程,可能在肾脏纤维化过程中发挥重要作用。
关键词:整合素连接激酶 人肾小球内皮细胞
单位:中山大学附属第五医院肾内科 广东珠海519000
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