摘要：目的构建针对人水通道蛋白1（AQP1）基因的shRNA表达质粒载体,并验证其干扰效果,为进一步探讨AQP1基因对人乳腺癌细胞的作用及机制建立基础。方法设计合成4对针对人AQP1基因不同位点的shRN段,通过DNA重组技术将其插入载体GV115中,构建AQP1-shRNA重组质粒,转染人乳腺癌MCF-7细胞,并通过实时荧光定量PCR（RT-PCR）和Western blot法检测干扰效率。结果 RT-PCR法证实AQP1在乳腺癌MCF-7细胞中有表达。测序验证表明4对靶向AQP1-shRNA表达载体均构建成功。4组干扰载体能够从基因和蛋白表达水平不同程度抑制AQP1表达,其中以AQP1-shRNA 4对AQP1的干扰效率最强。结论成功有效地构建了针对人AQP1基因的shRNA重组质粒,能够有效抑制人乳腺癌细胞MCF-7中AQP1的表达。

关键词：乳腺肿瘤 人水通道蛋白1 shrna 

单位：西安医学院第一附属医院检验科 710077